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細胞在MVE液氮罐保存方法及步驟

點擊次數(shù):1990 更新時間:2019-06-13

MVE液氮罐也被眾多領域所應用,不管是生活中還是生產中都能看到它的身影,如醫(yī)療行業(yè),生物醫(yī)學行業(yè),金屬生產行業(yè)以及精密儀器等。今天為大家介紹的是細胞在液氮罐保存方法及步驟

一、MVE液氮罐的應用范圍及用途

1.在生物醫(yī)學行業(yè)中的應用:目前主要是用于牛、羊等優(yōu)良種公畜以及珍惜動物的精液保存,以及遠距離的運輸和醫(yī)學中的疫苗、菌毒種、細胞以及人、動物的器官等浸泡于成都金鳳液氮罐儲存的液氮中,長期活性保存。

2.在金屬生產行業(yè)中的應用:利用成都金鳳液氮罐中儲存的液氮對金屬材料進行深冷處理,可以改變金屬材料的金相組織,顯著提高金屬材料的硬度、強度和耐磨性能。

精密儀器電子行業(yè)中的應用:將精密零件經過液氮深冷處理后進行裝配,提高零件裝配質量,從而提高設備或儀器的整機性能。

3.醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)的應用:用液氮容器內儲存的液氮作為制冷劑進行手術,治療或冷藏冷凍細胞、組織等。冷療儀用于醫(yī)院臨床各科室能夠代替手術,安全無毒,無害痛苦少,不損害健康組織,殺菌效果良好。

4.美容領域的應用:主要用液氮的超低溫來處理皮膚表層。如采用手術治療,疤痕往往是不可避免的后遺性缺陷,而冷凍治療卻不會出現(xiàn)這些情況,而且效果也比較理想。

二、細胞在液氮罐保存步驟:

怎么在液氮罐里儲存細胞呢?一般來講,凍存細胞的步驟會影響到細胞復蘇時的活力,所以在使用液氮罐儲存細胞時應小心并按步驟操作:

1、預先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預冷;

2、用胰酶對細胞進行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細胞(盡可能溫和);

3、再次用*培養(yǎng)液懸浮細胞,將預冷的凍存液加入消化*的細胞中,用滴管輕輕吹打混勻。

4、在每支凍存管中加入1ml細胞液,密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期。

5、凍存步驟的細致直接關系到細胞復蘇時的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐;或者可以在4℃,2h;

三、細胞在MVE液氮罐的儲存分為兩種:

液氮罐里一般灌有低溫液氮,細胞的儲存需要低溫環(huán)境,放入-196度的液氮里對細胞是長期保存的一個適合的環(huán)境。常規(guī)液氮罐是將細胞存入液氮罐的液相里儲存,有的方形抽屜式提籃,2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里,*浸入。使細胞*處于液氮-196度環(huán)境下,才能夠長期保存細胞。

 

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